ELISA試劑盒方法設計的原理根據(jù)是什么？【白細胞介素elisa試劑盒】

發(fā)布時間：2021/6/15 8:32:47 閱讀次數(shù)：1996

ELISA試劑盒在的實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種.如雙抗體夾心法間接法競爭法雙位點一步法捕獲法測IgM抗體應用親和素和生物素的ELISA.

ELISA試劑盒以免疫學反應為基礎,將抗原抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術.由于抗原抗體的反應在一種固相載體-聚苯y(tǒng)i烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性.

應用雙抗體夾心法測定標本水平.用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入,再與HRP標記的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色.

ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色.顏色的深淺和樣品呈正相關.用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,通過標準曲線計算樣品的濃度.

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